硝酸鎵卵巢癌細胞論文范文

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1統計學處理

使用SPSS19.0統計軟件進行分析，計量資料用（x-±s）表示，兩組比較采用作獨立樣本t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

Western結果進行計算機圖像分析，見表1、圖1。硝酸鎵組、順鉑組及聯合治療組HO-8910細胞Bcl-2的水平明顯低于空白對照組；Bax、Caspase-3的水平硝酸鎵組、聯合治療組明顯高于空白對照組，比較差異有統計學意義（P<0.05），而順鉑作用細胞Bax、Caspase表達變化不顯著。

3討論

早期，人們將放射性鎵用于對腫瘤的定位及檢測腫瘤細胞生長代謝的活性。2004年美國FDA已審批硝酸鎵注射液作為non.Hodgkin的淋巴癌治療的Ⅱ期臨床。鎵是繼鉑金屬類藥物之后第二個用于腫瘤治療的藥物，但它比順鉑類藥物療效顯著且毒性小，能有效地治療某些癌癥。人們逐漸認識到鎵的化療作用遠遠超出鎵對腫瘤的定位。且相關藥物已經進入臨床研究。目前認為鎵可能抗癌機制主要包括轉鐵蛋白受體途徑，研究發現在部分惡性淋巴瘤和膀胱癌中轉鐵蛋白受體表達增高，硝酸鎵對于這種類型的腫瘤的治療效果明顯可能是通過轉鐵蛋白受體途徑抑制了轉鐵蛋白受體的活性，阻止鐵進入細胞，致細胞內鐵缺乏而導致核糖核苷酸還原酶鐵依賴M2亞單位活性降低，抑制了細胞內相關基因的表達。

近年來，有關細胞凋亡在腫瘤發生，發展中的作用越來越受到重視細胞凋亡又稱細胞程序性死亡，腫瘤的發生與控制細胞增殖的癌基因的過度表達有關，也與抑制細胞凋亡基因的高表達及誘導細胞凋亡的抗癌基因變異失活有關細胞凋亡機制被不適當地終止是細胞癌變的重要前提，凋亡過程的受抑對腫瘤的發生發展起重要作用，Caspase-3，Bax及Bcl-2是與癌發生及預后密切相關的3個指標，Bcl-2基因是人體最主要的抗凋亡基因。它編碼的Bcl-2蛋白主要分布在線粒體外膜、細胞膜內表面、內質網膜及核膜等處。

Bcl-2抗凋亡的機制目前認為主要有：（1）拮抗促凋亡基因bax；（2）抑制促凋亡的蛋白質細胞色素c自線粒體釋放到胞質；（3）阻止胞質中的細胞色素c激活caspase；（4）有抗氧化及維持細胞內鈣穩態等作用；Bax基因屬于Bcl-2基因家族，編碼的Bax蛋白可與Bcl-2形成異二聚體，對Bcl-2產生阻抑作用。研究發現Bax/Bcl-2兩蛋白之間的比例關系是決定對細胞凋亡抑制作用強弱的關鍵因素，因此認為，Bax是極重要的促細胞凋亡基因一；Caspase-3通常以非活化的酶原形式存在于細胞中，只有當細胞凋亡時才被激活。

活化的Caspase-3蛋白能使許多與細胞結構、細胞周期及DNA修復相關的蛋白或激酶失活，是引發凋亡的蛋白酶級聯反應中的核心蛋白酶。所以，本次研究通過硝酸鎵體外作用卵巢癌HO-8910細胞，觀察三者蛋白水平表達變化，在分子層面分析鎵與腫瘤細胞的關系。最新的研究發現鎵能夠引起淋巴瘤細胞凋亡是通過內在的線粒體途徑。鎵通過激活Bax，破壞線粒體膜，釋放細胞色素C，進一步激活caspase-3，進而影響下游基因的表達，抑制腫瘤細胞生長繁殖。本實驗重點在此途徑進行研究。Western結果顯示，與正常對照組比較，硝酸鎵與順鉑對卵巢癌細胞在Bax、Caspase蛋白水平表達方面比較差異有統計學意義（P<0.05），Western灰度值分別是Bax（0.5100±0.0022/0.4300±0.0011）、Caspase（0.3400±0.0016/0.2100±0.0003）；順鉑作用細胞Bax、Caspase表達變化不顯著，Western灰度值分別是Bax（0.4300±0.0011/0.4200±0.0021）、Caspase（0.2100±0.0003/0.2000±0.0013）而硝酸鎵組變化明顯，提示硝酸鎵可能通過激活Bax，破壞線粒體膜，釋放細胞色素C，進一步激活caspase-3的線粒體途徑方式誘導細胞凋亡，由于未做線粒體相關的其他實驗，此作用效應還需進一步明確。順鉑非此通路作用，還可能與癌細胞本身此蛋白表達過低有關。

通過相關實驗以表明硝酸鎵在體外對HO-8910細胞有顯著的增殖抑制和誘導凋亡作用，本實驗在硝酸鎵作用下，卵巢癌細胞下調Bcl-2、上調Bax蛋白，活化Caspase可能是其誘導細胞凋亡機制之一。

作者：楊紅梅王學哲單位：遼寧省錦州市太和區醫院遼寧醫學院附屬第一醫院