沙棘對阿爾茨海默病模型大鼠范文

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【摘要】目的探討沙棘對阿爾茨海默病模型大鼠學習記憶能力及腦組織SOD（superoxidedismutase，SOD）活性及MDA（malondialdehyde，MDA）含量的影響,為沙棘的開發及臨床應用提供科學的理論依據。方法D-半乳糖腹腔注射9周,建立Wistar大鼠亞急性衰老模型后，第4周,Aβ25-35注入大鼠大腦海馬內，建立阿爾茨海默病(Alzheimer''''sdisease,AD)模型。成模后第2周開始用沙棘及腦復康治療8周。行為學采用Morris水迷宮方法檢測大鼠學習和記憶能力；取腦組織測定超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量。結果行為學檢測結果顯示，模型組大鼠學習和記憶能力明顯下降(P<0.05)，藥物組學習和記憶能力可見有明顯提高(P<0.05)；藥物組與模型組相比，腦組織SOD活性明顯增強(P<0.05)，MDA含量明顯降低（P<0.01）。結論沙棘能改善阿爾茨海默病大鼠學習記憶的能力，降低氧自由基對機體的損傷。

【關鍵詞】阿爾茨海默病；沙棘；學習記憶能力；超氧化物歧化酶；丙二醛

沙棘又名醋柳、酸刺子，為胡頹子科植物沙棘屬HippophaerhamnoidesL.,其化學成分主要有黃酮類、萜類、甾體類、維生素類、蛋白質和氨基酸類、揮發油和脂肪酸類、有機酸類、糖及微量元素等，是一種營養豐富，藥用價值極高的植物。沙棘對心、腦血管系統疾病及消化系統疾病具有顯著的作用，對肝臟具有保護作用，還可以清除人體內的自由基和抗衰老［1,2］。本實驗在D-半乳糖亞急性衰老模型基礎上建立Aβ25-35腦內注射AD復合模型，探討沙棘對AD大鼠的作用，為沙棘的開發及臨床應用提供理論依據。

1材料與方法

1.1藥物沙棘為市售品，取500g生藥材加入4000ml(8倍量)60%乙醇,放置1h,在60℃水浴回流2h,殘渣加入3000ml(6倍量)60%乙醇水浴回流2h,合并濾液,用旋轉蒸發儀回收溶劑,得粗粉59g(每克粗粉相當于生藥材8.5g)。D-半乳糖，β-淀粉樣蛋白（Aβ25-35），威海亞太藥業有限公司產品，SOD試劑盒與MDA試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.2動物及分組Wistar大鼠，雌雄各半，體重為（220±20）g，由延邊大學醫學部實驗動物科提供。實驗分組為：正常組正常常規飼養9周；Aβ25-35模型組以D-半乳糖〔50mg／(kg·d)〕腹腔注射9周,并在第4周時以Aβ25-35（1μg／μl）腦內海馬定點注射4μl；藥物對照組成模后第2周開始腦復康（0.5ml/d）灌胃8周；藥物組成模后第2周開始以沙棘水提物（1.0ml/d）灌胃8周。各組均在第4周時以Aβ25-35（1μg／μl）腦內海馬定點注射4μl。

1.3指標檢測

1.3.1大鼠記憶能力的檢測指標各組大鼠給藥9周后進行Morris水迷宮測試。連續6d記錄大鼠的逃避潛伏期，取其平均值作為大鼠學習能力的檢測指標。實驗第7天去除站臺，記錄大鼠的穿臺次數即每只大鼠從同一位點入水后，60s內游經站臺的次數，以此作為大鼠記憶能力的檢測指標。

1.3.2SOD活性和MDA含量的測定取腦組織按SOD測定試劑盒說明書進行，用可見光分光光度計測其OD值，計算SOD活性。MDA測定采用TBA法測得OD值，計算MDA含量。

1.3.3統計學處理實驗結果用SPSS10.0統計學軟件進行處理。結果數據以±s表示，采用單因素方差分析進行顯著性差異比較。

2結果

2.1沙棘對阿爾海默病大鼠逃避潛伏期的影響模型組與藥物組比較，大鼠逃避潛伏期有顯著性差異(P<0.05)；藥物對照組與模型組比較大鼠的逃避潛伏期有顯著性差異(P<0.01)。結果見表1。表1沙棘對阿爾茨海默病大鼠逃避潛伏期的影響（略）

2.2沙棘對阿爾茨海默病大鼠穿臺次數的影響藥物組與模型組比較穿臺次數明顯增多，有顯著性差異(P<0.05)；藥物對照組與模型組比較有顯著性差異（P<0.05）。結果見表2。表

2沙棘對阿爾茨海默病大鼠穿臺次數的影響（略）

2.3沙棘對阿爾茨海默病大鼠腦組織SOD活性的影響藥物組的SOD活性與模型組比較有顯著性差異(P<0.05)；藥物對照組與模型組比較有顯著性差異（P<0.01）。結果見表3。表3沙棘對阿爾茨海默病大鼠腦組織SOD活性的影響（略）

2.4沙棘對阿爾茨海默病大鼠腦組織MDA含量的影響藥物組腦組織MDA含量與模型組比較有顯著性差異(P<0.05)；藥物對照組與模型組比較有顯著差異（P<0.01）。結果見表4。表4沙棘對阿爾茨海默病大鼠腦組織MDA含量的影響（略）

3討論

AD是病因未明的原發性神經退行性疾病，可以導致學習和記憶力下降。學習和記憶屬于高級神經活動或腦的高級功能，學習主要是指人或動物通過神經系統接受外界環境信息而影響自身行為的過程，記憶是指獲得的信息或經驗在腦內貯存和提取(再現)的神經活動過程，二者密切相關［3,4］。學習和記憶是以行為反應作為測量指標的。因此，本實驗選用此方法檢測大鼠的空間學習、記憶能力的改變在morris水迷宮測試中，藥物組與模型組相比潛伏期縮短、穿臺次數增加,說明沙棘水提物對阿爾茨海默病大鼠的學習記憶障礙有明顯的改善作用。

近年來研究結果表明，AD患者腦組織SOD活性降低及MDA含量增高等證據，說明自由基與AD的發病關系密切。SOD具有抗衰老、抗腫瘤、抗輻射、增強人體免疫力的功能。SOD這種酶是自由基損害的主要防御酶，對自由基的毒性具有保護性作用［5～7］。本實驗結果顯示，與阿爾茨海默病大鼠模型組相比，藥物各劑量組腦中SOD活性均顯著增高，提示沙棘能提高機體抗自由基氧化的功能。

MDA是體內自由基與不飽和脂肪酸發生脂質過氧化反應的主要代謝產物，對細胞具有嚴重的損傷作用，常被用來間接反映機體的自由基代謝變化。MDA進一步與磷脂酰乙醇胺和蛋白質交聯，生成無活性脂褐質，沉積于組織細胞，破壞細胞膜結構，最后導致細胞無法維持正常代謝而死亡［8,9］。因此，自由基導致的脂質過氧化、細胞破裂和退行性病變與阿爾茨海默病有著密切的關系。本研究的結果顯示，沙棘組腦中的MDA含量低于模型組，由此推斷，沙棘通過對大鼠大腦組織中MDA含量的抑制可減輕阿爾茨海默病模型大鼠機體組織細胞的脂質過氧化程度。

沙棘的此種作用與沙棘的化學成分如黃酮、萜類、甾體類、維生素類、蛋白質和氨基酸類、揮發油和脂肪酸類、有機酸類、糖及微量元素等在心、腦血管系統疾病具有顯著的藥理作用，以及清除人體內的自由基和抗衰老的作用有關。

因此，本研究認為沙棘對阿爾茨海默病大鼠可以改善其學習記憶能力，其作用機制可能與抗自由基損傷，防止脂質過氧化作用有關。其作用機制方面還有待于今后深入的研究。新晨：

【參考文獻】

［1］齊虹凌，于澤源，李興國,等.沙棘研究概述［J］.沙棘,2005，18（2）：37.

［2］廉永善，陳學林.沙棘屬植物天然產物化學成分的時空分布［J］.西北師范大學學報（自然科學版），2000，36（1）：113.

［3］BaoruYang,positionandphysiologicaleffectsofseabuckthorn(hippophae)lipids［J］.TrendsinFoodScience＆Technology,2002,13:160.

［4］VahidBilalogluGuliyeva,MustafaGulb.HippophaerhamnoidesL.chro-matogmphicmethodstodeterminechemicalcomposition,useintraditionalmedicineandpharmacologicaleffects［J］.JournalofChromatographyB,2004,812:291.