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1儀器和材料
1.1儀器
NikonYS100生物顯微鏡(日本尼康公司),WD??9403C型紫外分析儀(北京六一儀器廠),HK3300H超聲波清洗器(上海科導超聲儀器有限公司),UV??1800型紫外分光光度計(北京瑞利分析儀器公司),硅膠G(青島海洋化工有限公司),綠原酸對照品(中國藥品生物制品檢定所),其余試劑均為分析純。
1.2材料
少花龍葵采自廣州市番禺區廣州大學城,經廣東藥學院中藥學院姬生國副教授鑒定為茄科植物少花龍葵SolallumnigrumL.verPauciflorumLiou。
藥材全株高約30~100cm,干燥品多破碎。根呈圓錐形,木化,長5~30cm,直徑0.5~3cm,有多數須根痕,表面棕黃色,質脆易折斷,折斷面不平坦;莖長圓柱形,光滑,多分支,近地面部分黃褐色,上部灰綠色,質脆易折斷;葉多皺縮,易碎,互生,展開后呈卵形至橢圓形,長4~8cm,先端漸尖,基部楔形,葉近全緣或有不規則角狀粗齒,上面深綠色,有小點,下面淡綠色,葉脈于葉背隆起,葉柄細弱,長約1cm,兩面具疏柔毛;花兩性,花序柄腋生,長1~2.5cm,2~5朵排列成傘形花序,黃白色,花萼5裂,裂片三角形;漿果球形肉質,直徑約5cm,綠色或紫黑色,皺縮,花萼宿存;種子細小,黃褐色,單果含種子50粒以上。氣微,味苦甘。
3顯微鑒別
3.1莖橫切面
表皮層數列細胞排列緊密,最外層細胞壁角質化增厚,可見非腺毛,偶見腺毛。非腺毛由1~4個細胞組成,腺毛多由4個腺頭細胞和1~2個腺柄細胞組成。表皮細胞內側有數層厚角細胞,皮層薄壁細胞類圓形。韌皮部細胞小排列緊密。中柱鞘纖維單個散在或數個聚集成束,形成層環明顯。木質部較寬,木纖維細胞排列較整齊,壁厚,直徑3.5~8μm,導管圓形或類圓形,單個或2~3個連在一起,直徑10.1~24.2μm。髓部寬廣,細胞圓形、橢圓形,草酸鈣砂晶和方晶、簇晶散在。見圖1、圖2。
1.非腺毛;2.腺毛;3.表皮層;4.皮層;5.中柱鞘纖維束;6.韌皮部;7.形成層;8.木質部;9.草酸鈣結晶;10.髓
圖1少花龍葵莖橫切面詳圖(略)
Figure1MicrographofthetransversesectionofCacumenofSolallumnigiumL.verPauciflorumLiou3.2葉橫切面
上下表皮均由一層細胞組成,類方形、長方形,排列緊密,外層角質增厚,非腺毛由1~4個細胞組成,腺毛腺頭1~2個細胞、腺柄1~4個細胞,主脈上下表皮內側均有厚角組織。上表皮下有柵欄細胞一列,海綿組織細胞排列疏松。維管束為外韌形,半月形。韌皮部窄,細胞較小。薄壁細胞中可見有草酸鈣簇晶、方晶和針晶,簇晶直徑19.6~69.5μm。見圖3、圖4。
1.表皮層細胞壁角質化增厚;2.皮層;3.韌皮部;4.形成層;5.中柱鞘纖維束;6.木質部;7.髓部;8.草酸鈣結晶
圖2少花龍葵莖橫切面簡圖(略)
Figure2MicrographofthetransversesectionofCacumenofSolallumnigiumL.verPauciflorumLiou
1.腺毛;2.非腺毛;3.上表皮;4.柵欄組織;5.海面組織;6.下表皮;7.葉脈維管束;8.草酸鈣方晶;9.厚角組織
圖3少花龍葵葉橫切面詳圖(略)
Figure3MicrographofthetransversesectionofFoliumofSolallumnigiumL.verPauciflorumLiou
1.毛茸;2.上表皮;3.柵欄組織;4.海面組織;5.下表皮;6.葉脈維管束;7.草酸鈣結晶;8.厚角組織
圖4少花龍葵葉橫切面簡圖(略)
Figure4MicrographofthetransversesectionofFoliumofSolallumnigiumL.verPauciflorumLiou
3.3粉末
粉末黃綠色。表皮細胞垂周壁彎曲,氣孔不定式或直軸式。花粉粒黃色,直徑11.1~24.1μm,外壁表面有細密短刺及圓形細顆粒狀雕紋,具3個萌發孔。草酸鈣針晶較多,長約5.8~16.1μm。腺毛腺頭由1~4個細胞組成,內含深黃色分泌物,腺柄1~2個細胞,長35.2~107.5μm。非腺毛由1~4個細胞組成,常彎曲,長108.5~218.7μm,壁上有疣狀突起。草酸鈣簇晶棱角較尖,直徑19.6~69.5μm;方晶較多,直徑4.6~8.5μm;砂晶較少。淀粉粒類圓形,橢圓形,單粒或復粒。尚可見色素塊,具緣紋孔導管直徑61.6~110.1μm。纖維長110.2~327.1μm,平直,多碎斷,細胞壁增厚明顯。石細胞類圓形單個散在或數個成群,孔溝明顯。薄壁細胞呈類圓形或者橢圓形,壁厚,常成群存在。厚角細胞類長方形、多角形,螺紋導管多見。見圖5。
1.石細胞;2.具緣紋孔導管;3.草酸鈣針晶;4.厚角細胞;5.草酸鈣方晶;6.非腺毛;7.腺毛;8.下表皮細胞及氣孔;9.纖維;10.草酸鈣砂晶;11.草酸鈣簇晶;12.淀粉粒;13.螺紋導管;14.上表皮細胞及氣孔
圖5少花龍葵粉末圖(略)
Figure5MicrographofthetransversesectionofSolallumnigiumL.verPauciflorumLiou
4理化鑒別
4.1顯色沉淀試驗
4.1.1生物堿類成分鑒別取本品粗粉1g,加入體積分數70%乙醇溶液20mL,回流提取30min,濾過,濾液蒸干,殘渣加HCl溶液(1→100)5mL使溶解,濾過,濾液分置3支試管中,第1管加碘化鉍鉀試液1~2滴,有橘紅色沉淀產生;第2管加入碘化汞鉀試液1~2滴,有淺黃色沉淀產生;第3管加入硅鎢酸試液,有灰白色沉淀產生。
4.1.2皂苷類成分鑒別取本品粗粉2g,加水200mL,煮沸15min后,濾過,濾液2mL,置具塞試管中,塞緊,用力振搖1min,產生持久性泡沫,15min不消失。
4.1.3黃酮類成分鑒別取本品粗粉0.5g,加入體積分數60%乙醇10mL超聲提取30min,濾過,取濾液2份各1mL,分置2支試管中,第1支試管中,加少量的鎂粉,再加HCl溶液1mL,溶液顯紅色;第2支試管中,加入濃氨水1~2滴,溶液呈亮黃色;另取濾液滴于濾紙上,然后滴加AlCl3溶液,置紫外燈(365nm)下觀察,液面交界處呈現黃綠色熒光。
4.2薄層層析鑒別
取本品粗粉1g,加入甲醇10mL,超聲提取30min,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇1mL使溶解,作為供試品溶液。另取對照藥材1g,同法制成對照藥材溶液。取綠原酸對照品,加甲醇制成每1mL含1mg的對照品溶液。取供試品、對照品和對照藥材溶液各2μL,分別點于同一聚酰胺薄層板上,以體積分數36%醋酸溶液為展開劑,上行展開,取出,晾干,置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同的藍色熒光斑點。
5討論
5.1顯微鑒別中,少花龍葵的莖橫切面中柱鞘纖維成束成環,木質部導管單個散在或2~3個連在一起,主脈維管束為外韌形,半月形,以上特征與廣西產的少花龍葵的顯微特征一致。薄壁細胞中含有草酸鈣簇晶、砂晶、方晶,氣孔為直軸式和不定式,非腺毛較多,具壁疣,腺毛腺頭1~4個細胞柄1~2個細胞,有時形成腺鱗,以上特征與廣西產的少花龍葵的顯微特征有差別,廣西產的少華龍葵中少見腺毛,非腺毛沒有說明詳細特征,草酸鈣結晶中沒有具體到何種結晶類型[2]。新晨
5.2通過薄層色譜鑒別發現少花龍葵中含有綠原酸。從定性鑒別試驗可見,少花龍葵中含有生物堿、皂苷、黃酮類等成分。
5.3少花龍葵作為藥食同源的中草藥,具有較好的應用前景,本文較詳細報道了少花龍葵的性狀、顯微以及理化鑒別特征,在這些特征中與廣西產的少華龍葵有一定的差別,可能是由于產地的不同而導致的差異,本研究可為開發利用該藥材提供參考依據。
【參考文獻】
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