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【摘要】目的對土甘草水提取物和醇提取物的抗炎、鎮痛作用及急性毒性進行研究。方法采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法、醋酸扭體法觀察土甘草的抗炎、鎮痛作用；以土甘草水提物1.57g·ml-1，醇提物2.40g·ml-1，最大劑量40ml·kg-1分別對小鼠灌胃給藥，觀察其急性毒性。結果土甘草對二甲苯所致小鼠耳腫脹有明顯的抑制作用（P<0.05）；對0.7%醋酸所致小鼠扭體反應有明顯的抑制作用（P<0.05）。土甘草水提物對小鼠灌胃給藥的最大耐受量為62.8g生藥·kg-1；醇提物對小鼠灌胃給藥的最大耐受量為96.0g生藥·kg-1。結論土甘草具有一定的抗炎、鎮痛作用；土甘草水提物及醇提取物未出現其它毒性反應。
【關鍵詞】土甘草；藥理作用；急性毒性
壯藥土甘草為豆科植物毛果魚藤DerriseriocarpaHow的干燥根、藤，亦稱“雞血藤”“藤子甘草”等，分布在廣西、云南一帶。根入藥，補血、潤腸，用于發燒、胸悶、咳嗽、咽喉痛；藤入藥，利尿除濕、鎮咳化痰，用于小便澀痛、咳嗽、水腫等。壯族民間常用于咳血、咳嗽等癥。至今在國內公開發行期刊中，只有有關其生藥學研究，未見有關土甘草藥理毒理學研究資料。為進一步研究開發和臨床應用提供實驗依據，本文對其開展抗炎、鎮痛的藥效作用及急性毒性實驗研究。
1材料與儀器
1.1藥物與試劑
土甘草藥材購自廣西靖西縣藥市并經廣西中醫學院生藥鑒定教研室田輝副教授鑒定為豆科植物毛果魚藤DerriseriocarpaHow。
土甘草水提取物和乙醇提取物樣品由本實驗室自制提供。二甲苯為廣州新港化工廠生產；阿司匹林片為湖南新匯制藥有限公司生產，批號080101。
1.2動物
SPF級昆明種小鼠，18～22g，雌雄兼用，清潔級動物，由廣西醫科大學實驗動物中心提供，許可證號：SCXK桂2003-0003。小鼠分性別飼養于空調室內，室溫（22±2）℃，濕度（70±5）%，喂標準顆粒飼料，自由飲水和攝食。
1.3儀器
棱光-722型可見分光光度計；FA1004型萬分之一電子天平，由上海精密科學儀器有限公司生產。
2方法與結果
2.1二甲苯致小鼠耳腫廓脹實驗
昆明種小鼠50只，隨機分為5組。即空白對照組、陽性對照組（阿司匹林200mg·kg-1）和土甘草高、中、低劑量組。分別灌胃給藥1次/d，連續給藥4d，末次給藥30min后，于小鼠右耳兩面涂二甲苯0.05ml致炎，左耳不涂為正常耳；30min后處死小鼠，沿耳廓基線剪下雙耳，用直徑8mm打孔器在同一部位取下耳片，于分析天平上稱重，以左右耳片重量差值表示炎性腫脹程度。計算抑制率。抑制率(%)=（空白對照組腫脹度-給藥組腫脹度）÷空白組腫脹度×100%。見表1～2。表1土甘草水提取物對小鼠二甲苯致耳廓腫脹的影響（略）表2土甘草醇提取物對小鼠二甲苯致耳廓腫脹的影響（略）
實驗結果顯示,土甘草水提取物高、中、低劑量組均對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹有明顯抑制作用（P<0.01，P<0.05），其抑制率均在30%以上，抑制率隨劑量的增大而增大，且抗炎抑制率高于阿司匹林；土甘草醇提取物中、高劑量對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹有明顯抑制作用(P<0.05)，其中中劑量抑制率低于阿司匹林，而高劑量抗炎抑制率則高于阿司匹林。
2.2小鼠醋酸致痛扭體法實驗
取健康小鼠50只，雌雄各半，隨機分成5組。即空白對照組、陽性對照組（阿司匹林200mg·kg-1）和土甘草高、中、低劑量組。每組10只，分別灌胃藥物或等量水4d，第4天藥后1h各組小鼠均腹腔注射0.7%醋酸溶液0.2ml/只，觀察注射醋酸后10min內小鼠扭體反應的次數。求得扭體反應抑制率。抑制率(%)=（空白組扭體反應次數-給藥組扭體反應次數）÷空白組扭體反應次數×100%。見表3～4。表3土甘草水提取物扭體法鎮痛實驗結果（略）表4土甘草醇提取物扭體法鎮痛實驗結果（略）
實驗結果顯示，土甘草水提取物高、中、低劑量均具有抑制小鼠醋酸扭體反應的作用（P<0.01），其鎮痛率低于阿司匹林。抑制率均在50%以上，抑制率隨劑量的增大而增大；土甘草醇提取物高、中劑量具有抑制小鼠醋酸扭體反應的作用（P<0.01，P<0.05），其鎮痛率低于阿司匹林，抑制率隨劑量的增大而增大，以高劑量抑制作用尤為明顯。
2.3毒理研究
2.3.1水提物最大耐受量（MTD）測定
取土甘草切片，晾干，粉碎成粗粉，加8倍量水，浸泡后加熱煮沸提取，冷卻后用100目濾布濾過，煮提2次，合并濾液。濾液水浴濃縮。實驗時以蒸餾水稀釋至1.57g/ml。參考預實驗結果，取禁食16h的小鼠20只，雌雄各半，按1.57g/ml、40ml·kg-1灌胃給藥，于給藥后1、24、72h至第7天，每天觀察并記錄小鼠的體質量、皮膚毛發、眼和粘膜的變化、呼吸、中樞神經系統、四肢活動等變化及其中毒和死亡情況。以1.57g·ml-1，40ml·kg-1土甘草水提物灌胃給藥后，小鼠均出現蜷臥少動癥狀，24h后恢復正常。觀察7d，小鼠的行為、進食、皮毛、眼和粘膜、呼吸、四肢活動和體質量均無異常，未出現其它毒性反應。土甘草水提物對小鼠灌胃給藥的最大耐受量為62.8g生藥·kg-1。土甘草水提物灌胃給藥對小鼠體質量的影響結果見表5。
2.3.2醇提物最大耐受量（MTD）測定
取土甘草切片，晾干，粉碎成粗粉，置燒瓶中，加8倍量75%乙醇，浸泡后加熱回流提取，冷卻后用100目濾布濾過，回流提取2次，合并濾液。濾液減壓回收乙醇，揮盡乙醇并水浴濃縮。實驗時以蒸餾水稀釋至2.40g·ml-1。參考預實驗結果，取禁食16h的小鼠20只，雌雄各半，按1.57g·ml-1，40ml·kg-1灌胃給藥，于給藥后1，24，72h至第7天，每天觀察并記錄小鼠的體質量、皮膚毛發、眼和粘膜的變化、呼吸、中樞神經系統、四肢活動等及其中毒和死亡情況。以2.40g·ml-1，40ml·kg-1土甘草醇提物灌胃給藥后，小鼠均出現蜷臥少動癥狀，24h后恢復正常。觀察7d，小鼠的行為、進食、皮毛、眼和粘膜、呼吸、四肢活動和體質量均無異常，未出現其它毒性反應。土甘草醇提物對小鼠灌胃給藥的最大耐受量為96.0g生藥·kg-1。土甘草醇提物灌胃給藥對小鼠體質量的影響結果見表5。表5土甘草水提物和醇提物灌胃給藥對小鼠體質量的影響（略）
2.4統計學分析
采用SPSS10.0統計軟件分析數據。所得實驗數據表示，采用t檢驗作組間比較差異顯著性，P<0.05和P<0.01認為有顯著差異，具有統計學意義。
3討論
土甘草提取物抗炎實驗顯示，土甘草水提取物各劑量抗炎效果較好（P<0.01，P<0.05），醇提取物高劑量組也有較好的抗炎作用（P<0.05）。實驗中鎮痛作用部分證明，土甘草水提取物各劑量及醇提取物高、中劑量均具有抑制小鼠醋酸扭體反應的作用（P<0.01，P<0.05），且抑制率隨劑量的增大而增大。以上實驗提示，土甘草具有良好的抗炎、鎮痛作用。急性毒性實驗結果顯示，土甘草水提取物及醇提物對小鼠灌胃給藥的最大耐受量分別為62.8g生藥·kg-1和96.0g生藥·kg-1。有關土甘草的抗炎、鎮痛機制尚不清楚，有待進一步研究確定。新晨：
【參考文獻】
1］廣西壯族自治區中醫藥研究所.廣西藥用植物名錄［M］.南寧:廣西人民出版社，1986：232.
［2］江蘇新醫學院.中藥大辭典［M］.上海：上海科學技術出版社，1986：2698.
［3］徐叔云，卞如濂，陳修，等.藥理實驗方法學，第3版［M］.北京：人民衛生出版社，2002