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《安徽農業科學雜志》2014年第二十五期
1含量測定
1.1對照品的制備。精密稱取五氧化二磷真空干燥24h的綠原酸對照品2.0mg溶于2ml甲醇,用移液管吸取0.5ml,置于10ml棕色容量瓶中,加50%甲醇至刻度,制成50μg/ml的對照品溶液。
1.2樣品溶液的制備。取金銀花細粉及超微粉粉末樣品各0.5g,精密稱定,置具塞三角瓶中,加入50%甲醇50ml,稱定重量,超聲30min,擦干外壁水分,放冷,再稱定重量,用50%甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過,精密量取續濾液5ml于25ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,制成樣品溶液。
1.3測定波長的選擇。吸取對照品溶液1.0ml置于10ml容量瓶中,加甲醇稀釋值刻度,紫外掃描顯示327nm處有最大吸收,每隔1h復測,結果10h內無變化。
1.4標準曲線的繪制。分別吸取對照品0.5、0.8、1.0、1.5、1.8、2.0ml置于10ml容量瓶中,加50%甲醇稀釋至刻度,制成濃度分別為2.5、4.0、5.0、7.5、9.0、10.0μg/ml的溶液,在327nm波長處測其吸光度,繪制標準曲線。
1.5樣品含量測定。將超微細粉樣品與普通細粉樣品溶液分別稀釋10倍,超微細粉標為1號樣品,普通細粉標為2號樣品,分別在327nm波長處測定其吸光度。
2結果與分析
2.1超微細粉與普通細粉顯微觀察結果與分析從OLMY-PUSIX7型倒置熒光顯微鏡拍攝的圖片(圖1a)可以看出,金銀花細粉中的花粉粒多見完整細胞,而超細粉中的花粉粒多見破壁細胞;從金銀花細粉和超細微粉非腺毛(圖1b)可以看出,金銀花細粉中非腺毛多見細長完整細胞,而超細粉中的非腺毛多為破碎細胞。
2.2樣品含量測定通過“1.3.2.4”方法,繪制標準曲線,發現金銀花超微細粉與普通細粉在2.5~10.0μg/ml內呈線性,其線性回歸方程為:A=0.0864C+0.0053(R=0.994)。利用紫外分光光度法分別測定了金銀花普通細粉(80目)、超微細粉粉末綠原酸的含量,結果表明,經過超聲提取后,金銀花的有效成分綠原酸含量超微細粉比普通細粉(80目)提高14.4%(表1)。
3結論與討論
顯微特征比較和含量測定表明,金銀花連翹經過超微粉碎后,細胞破壁明顯,大部分細胞已沒有完整結構,藥物的有效成分不需要經過細胞壁和細胞膜的交換過程而被溶提出來,中藥有效成分的釋放量大幅度提高,超微粉碎非常有利于中藥材金銀花有效成分的溶出,且可大大簡化提取工藝過程,有利于降低生產成本。
作者:張璐單位:山西省醫藥與生命科學研究院