產纈草的生藥學研究范文

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1方法與結果

1.1根、莖、葉（過中脈）橫切面的顯微鑒別纈草的根橫切面呈類圓形。表皮為1列類圓形或類長方形細胞，細胞較大，多切向延長，排列緊密，壁木栓化。下皮細胞1～2層，類橢圓形或不規則形，壁稍厚。皮層較寬，細胞內含有眾多淀粉粒，油細胞散在。內皮層細胞1層，細胞切向排列，凱氏點明顯。中柱鞘細胞1～2層，切向排列。維管束外韌型。韌皮部狹窄，形成層不明顯，木質部排列成環狀，導管類圓形或多角形。中部有髓（圖2A）。纈草的莖橫切面呈類圓形，有波狀棱脊14～20個。表皮為1列較小類方形或長方形細胞，外被角質層和非腺毛。表皮下為數列厚角細胞，在棱脊內側厚角組織較發達。內皮層明顯。維管束外韌型；形成層成環；木質部外側為2～6層木纖維細胞，多角形，排列成環，導管多角形或類圓形，數個徑向排列。髓部寬廣，中央破裂成空洞狀（圖2B）。纈草葉的上、下表皮均為1列切向延長的細胞，類圓形；非腺毛2～5細胞，先端細胞較長，表面有疣狀突起。柵欄細胞1列，不過中脈。海綿細胞類圓形，排列疏松。中脈上下表皮細胞下均有厚角組織，下部厚角組織較發達，中脈遠軸面頂端凸起。中脈維管束新月形，外韌型。導管多角形或類圓形，數個徑向或成群排列。

1.2粉末的特征纈草粉末呈灰綠色。非腺毛較多，多斷碎，具明顯的疣狀突起。石細胞較多，類圓形、長橢圓形，壁厚，孔溝明顯。花冠裂片頂端表皮細胞外壁突起呈乳頭狀。花粉粒類圓形，直徑48～65μm，表面有圓顆粒狀雕紋，具3孔溝。可見草酸鈣晶體，呈方塊狀或類簇晶狀。木纖維成束，直徑12～24μm。孔紋導管多見，直徑19～41μm；螺紋導管直徑10～32μm。淀粉粒極多，多為單粒，呈圓形或橢圓形，臍點點狀，層紋不明顯（圖3）。

1.3薄層鑒別取纈草粉末3g，加甲醇60mL，超聲30min，過濾，揮去濾液中的甲醇，殘渣中加甲醇2mL使溶解，作為供試品溶液。照《中國藥典》2010年版附錄VIB薄層色譜法，吸取供試品溶液各15μL，分別條狀點樣于同一硅膠GF254薄層板，以石油醚（60～90℃）－乙酸乙酯－丙酮（50．51）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（254nm）下檢視。各供試品色譜相應的位置上，分別顯相同顏色的斑點（圖4）。

1.4浸出物、總灰分、酸不溶性灰分、水分的測定照《中國藥典》2010年版附錄XA項下浸出物測定法中的冷浸法、附錄IXK項下總灰分測定法和附錄IXH項下水分測定法第二法，分別測定樣品中浸出物、總灰分、酸不溶性灰分和水分。計算10批樣品中的浸出物為2．36％～8．72％，平均5．08％；總灰分為852％～10．94％，平均9．66％；酸不溶性灰分為0．59％～2．42％，平均1．28％；水分為10．34％～11．57％，平均10．92％（表1）。

2討論

纈草的顯微鑒別要點為：根橫切面主要從表皮細胞、內皮層細胞的特征，皮層的寬度、油細胞的分布等進行鑒別；莖橫切面主要從棱脊的數目、維管束的形狀、皮層和髓部的寬度進行鑒別；葉橫切面主要從非腺毛、中脈維管束的特征進行鑒別；粉末主要從石細胞、花粉粒、草酸鈣晶體的形狀、大小進行鑒別。

纈草三酯和纈草烯酸是纈草具鎮靜作用的主要有效成分，纈草三酯是纈草屬的特征性化合物。但實驗中發現：纈草根及根莖的薄層色譜在與上述對照品相對應的位置上，斑點清晰；而纈草全草的薄層色譜無相應斑點。經HPLC驗證，纈草全草中纈草三酯的含量極微，與文獻報道一致，纈草烯酸的含量亦極微。鑒于此，文中建立的TLC法暫無對照品。曾分別考察了石油醚（30～60℃）－丙酮、三氯甲烷－甲醇、乙酸乙酯－甲醇、石油醚（60～90℃）－丙酮、石油醚（60～90℃）－乙酸乙酯、石油醚（60～90℃）－乙酸乙酯－丙酮等展開劑系統，其中，石油醚（60～90℃）－乙酸乙酯－丙酮（5051）系統下展開時，各特征斑點分離度良好，Rf值適中，因此確定為展開系統。分別使用乙醚和甲醇提取供試品，兩種溶劑提取的供試品的特征斑點差異小，因此，選用甲醇作為提取溶劑。對展開環境條件的耐用性進行了考察，不同飽和時間下纈草的特征斑點均無拖尾，可不飽和直接點樣展開。對展開的溫度、濕度分別進行了考察，最佳相對濕度為32％～65％，最佳展開溫度為5～25℃。

作者：鐘世紅 古銳 黃明貴 馬貞 曹赟 單位：成都醫學院藥學院 成都中醫藥大學