金花茶葉的薄層色譜鑒別范文

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《中國民族民間醫藥雜志》2014年第二十一期

1方法與結果

1.1齊墩果酸TLC鑒別

1.1.1對照品溶液的制備稱取齊墩果酸標準品適量置于5ml容量瓶中，純甲醇溶解，制得每毫升約含0.04mg齊墩果酸的對照品溶液。

1.1.2供試品溶液的制備分別稱取1g普通金花茶、東興金花茶、顯脈金花茶藥材，置于具塞錐形瓶中，加入95%乙醇50ml，靜置浸泡30min，超聲提取1h;過濾，取續濾液，蒸干，殘渣用甲醇溶解，置于5ml容量瓶中，定容，得供試品A(普通金花茶)、B(東興金花茶)、C(顯脈金花茶)。

1.1.3薄層色譜鑒別方法普通硅膠板點樣，取齊墩果酸對照品溶液、供試品A、供試品B、供試品C點樣，點樣量為9μl，石油醚－乙酸乙酯－丙酮(7∶2∶1)為展開劑，預飽和10min，10%硫酸乙醇溶液顯色，105℃的烘箱中烘7min，紫外燈(365nm)下檢視。結果見圖1。在齊墩果酸對照品斑點相同位置上，三個品種中普通金花茶齊墩果酸斑點明顯，顯脈金花茶齊墩果酸斑點較淡，東興金花茶齊墩果酸未見明顯斑點。

1.2蘆丁TLC鑒別

1.2.1對照品溶液的制備精密稱取蘆丁對照品適量置于5ml容量瓶中，純甲醇溶解，制得每毫升約含0.04mg蘆丁的對照品溶液。

1.2.2供試品溶液的制備分別稱取1g普通金花茶、東興金花茶、顯脈金花茶藥材，置于具塞錐形瓶中，加40ml氯仿溶液，60℃恒溫水浴鍋中加熱回流1h，過濾，棄去氯仿液，揮干藥渣，0.5ml蒸餾水攪拌潤濕，加入10ml水飽和正丁醇溶液，超聲處理30min，過濾，取濾液蒸干，殘渣用甲醇溶解并定容至5ml容量瓶中制得供試品D(普通金花茶)、E(東興金花茶)、F(顯脈金花茶)。

1.2.3薄層色譜鑒別方法GF254硅膠板點樣，點樣量9μL，乙酸乙酯－甲醇－水－甲酸(9∶2∶1∶0.1)為展開劑，預飽和10min，展畢除去展開劑后于紫外燈光(254nm)下檢視。結果見圖2。在蘆丁對照品斑點相同位置上，三個品種中普通金花茶蘆丁斑點明顯，顯脈金花茶蘆丁斑點較淡，東興金花茶蘆丁未見斑點。

1.3人參皂苷TLC鑒別

1.3.1對照品溶液的制備精密稱取人參皂苷Rg1對照品適量，純甲醇溶解，制得每毫升約含0.04mg人參皂苷Rg1的對照品溶液。

1.3.2供試品溶液的制備分別精密稱取1g普通金花茶、東興金花茶、顯脈金花茶藥材，置于具塞錐形瓶中，加50%乙醇50ml，靜置浸泡30min，超聲提取1h;過濾，取續濾液，蒸干，殘渣用甲醇溶解，置于5ml容量瓶中，定容，得供試品G(普通金花茶)、H(東興金花茶)、I(顯脈金花茶)。

1.3.3薄層色譜鑒別方法普通硅膠板點樣，點樣量為12μl，氯仿－乙酸乙酯－甲醇－水(3∶8∶4.4∶1.6)為展開劑，預飽和10min，10%硫酸乙醇溶液顯色，105℃的烘箱中烘10min，紫外燈(365nm)下檢視。結果見圖3。在人參皂苷Rg1對照品斑點相同位置上，三個品種中普通金花茶人參皂苷Rg1斑點明顯，顯脈金花茶人參皂苷Rg1斑點較淡，東興金花茶人參皂苷Rg1未見明顯斑點。

2討論

2.1展開劑的選擇在齊墩果酸TCL鑒別展開劑的選擇中，分別考察了石油醚－乙酸乙酯－丙酮(7∶2∶1)、正己烷－乙酸乙酯(10∶3)、氯仿－甲醇－冰醋酸(20∶1∶0.2)為展開劑，結果以石油醚－乙酸乙酯－丙酮(7∶2∶1)為展開劑展開斑點成點、清晰、圓整，干擾少;在蘆丁TCL鑒別展開劑選擇中，分別考察了乙酸乙酯－甲醇－水－甲酸(9∶2∶1∶0.1)、乙醇－丙酮－水(7∶5∶6)、乙酸乙酯－甲酸－水(8∶1∶1)為展開劑，結果以乙酸乙酯－甲醇－水－甲酸(9∶2∶1∶0.1)為展開劑展開斑點成點、清晰、圓整，干擾少;在人參皂苷Rg1的TCL鑒別展開劑選擇中，分別考察了氯仿－乙酸乙酯－甲醇－水(3∶8∶4.4∶1.6)、氯仿－乙酸乙酯－甲醇－丙酮－甲酸(5∶1∶1∶1∶0.2)、氯仿－甲醇－水(13∶7∶2)為展開劑，結果以氯仿－乙酸乙酯－甲醇－水(3∶8∶4.4∶1.6)為展開劑展開斑點成點、清晰、圓整，干擾少。

2.2顯色劑的選擇在齊墩果酸和人參皂苷Rg1顯色劑的選擇中，分別以10%硫酸乙醇溶液、3%香草醛～5%硫酸乙醇溶液顯色，結果均顯示以10%硫酸乙醇溶液顯色斑點清晰，檢視效果好。

2.3提取方法的選擇在齊墩果酸提取條件的選擇中，取普通金花茶葉分別用50%乙醇、95%乙醇、50%甲醇、95%甲醇超聲提取，制得4份供試品溶液，同一薄層色譜條件展開，結果顯示95%乙醇提取的樣品溶液中齊墩果酸斑點最為清晰、明顯;在蘆丁提取條件的選擇中，取普通金花茶葉分別用50%乙醇、95%乙醇、50%甲醇、95%甲醇超聲提取，另按照2.2.2樣品溶液的制備的方法提取，共制得5份樣品溶液，同一薄層色譜條件展開，結果以2.2.2樣品溶液制備的方法所得的斑點成點、最清晰、干擾少;在人參皂苷Rg1提取條件的選擇中，取普通金花茶葉分別用50%乙醇、95%乙醇、50%甲醇、95%甲醇超聲提取，另按《中國藥典》中人參的人參皂苷Rg1薄層鑒別［10］方法提取，共制得5份供試品溶液，同一薄層色譜條件展開，結果顯示50%乙醇提取的樣品溶液中人參皂苷Rg1斑點最為清晰、明顯、干擾斑點少。

2.4薄層板的選擇在蘆丁薄層板的選擇中，分別考察了普通硅膠板、GF254硅膠板、聚酰胺薄膜進行比較，結果以GF254硅膠板上蘆丁斑點成點、清晰、圓整，干擾少，故以GF254硅膠薄層層析板作為金花茶葉中蘆丁鑒別的薄層板。

3結論

本實驗薄層色譜結果顯示，不同品種的金花茶中化學成分基本相似，但相同成分的含量相差較大，這三種成分均以普通金花茶中含量最高，東興金花茶中含量最低。但是，這三種成分是否為金花茶的主要藥效成分及這些成分含量的高低與金花茶的藥理作用相關性，還有待于進一步研究。

作者：梁霄莫建光劉布鳴黃艷高微黎凱群黎奕良單位：廣西中醫藥大學廣西分析測試研究中心廣西中藥質量標準研究重點實驗室